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豬偽狂犬病三基因缺失活疫苗SA215株(撲偽優(yōu))科研成果及高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化

來源:畜牧業(yè)協(xié)會(huì) 發(fā)布時(shí)間:2014/9/5 10:06:54 點(diǎn)擊率:2186

四川華神獸用生物制品有限公司 為四川畜科公司的全資子公司,是專門從事獸用生物制品的研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與技術(shù)服務(wù)的國(guó)家高新技術(shù)企業(yè),承擔(dān)了十多項(xiàng)國(guó)家與省科研項(xiàng)目,擁有13項(xiàng)發(fā)明專利及實(shí)用新型專利。公司以“發(fā)展生物高科技,服務(wù)現(xiàn)代畜牧業(yè)”為企業(yè)發(fā)展理念,著眼于完整畜牧產(chǎn)業(yè)鏈,打造集產(chǎn)學(xué)研、科工貿(mào)為一體的高技術(shù)創(chuàng)新畜科生物產(chǎn)業(yè)園區(qū),批準(zhǔn)成立了四川省生物工程技術(shù)研究中心,實(shí)現(xiàn)人才、技術(shù)、產(chǎn)品的聚集和輻射高地。      

公司以四川省畜牧科學(xué)院、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院等為強(qiáng)大技術(shù)依托,于2012年遷至成都西南航空港經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū),占地80畝,一期投資2.5億,建有3個(gè)生產(chǎn)車間5條生產(chǎn)線,具有生產(chǎn)胚毒活疫苗、細(xì)胞毒活疫苗、豬瘟活疫苗(兔源)的能力。其中,與四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物生物技術(shù)中心共同研究開發(fā)的豬偽狂犬病三基因缺失活疫苗SA215株(撲偽優(yōu))為我國(guó)第一株具有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的動(dòng)物病毒基因工程疫苗,達(dá)到國(guó)際領(lǐng)先水平。投產(chǎn)初期年產(chǎn)值達(dá)3.5億元。


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公司戰(zhàn)略合作伙伴--四川農(nóng)業(yè)大學(xué)成立于1906年,于1996年進(jìn)入國(guó)家“211” 重點(diǎn)工程學(xué)校。學(xué)校設(shè)22個(gè)學(xué)院、12個(gè)研究所和多個(gè)研究中心、84個(gè)本科專業(yè)、91個(gè)碩士授位專業(yè)、63個(gè)博士授位專業(yè)、7個(gè)一級(jí)學(xué)科博士后流動(dòng)站、4個(gè)國(guó)家級(jí)重點(diǎn)學(xué)科、19個(gè)部省重點(diǎn)學(xué)科,獲得500多項(xiàng)重大科研成果,70%科研成果轉(zhuǎn)化推廣。

四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物生物技術(shù)中心為豬偽狂犬病活疫苗SA215株(撲偽優(yōu))的主研機(jī)構(gòu),成果主持人郭萬柱教授是首批學(xué)術(shù)和技術(shù)帶頭人,享受國(guó)務(wù)院特殊津貼高級(jí)專家。豬偽狂犬病三基因缺失活疫苗(SA215株)獲國(guó)家二類新獸藥證書和國(guó)家科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)。

生物技術(shù)中心先后承擔(dān)了國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目《偽狂犬病重組疫苗的研究》、《偽狂犬病基因缺失株的構(gòu)建》和國(guó)家“九五”科技攻關(guān)項(xiàng)目《偽狂犬病基因缺失疫苗》,并列入國(guó)家“863”高科技研發(fā)項(xiàng)目,現(xiàn)在正在實(shí)施國(guó)家發(fā)改委“綠色農(nóng)用生物產(chǎn)品高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化專項(xiàng)”。以我國(guó)具有代表意義的毒株——PRV Fa株為起始材料,首次在國(guó)內(nèi)通過酶切、同源重組等基因工程操作方法,構(gòu)建了偽狂犬病病毒三基因缺失株SA215(gE- 、gI-和TK-)。

以上研究成果通過了以殷震院士為主任的專家委員會(huì)驗(yàn)收鑒定,結(jié)論認(rèn)為該項(xiàng)研究系列成果豐富了我國(guó)動(dòng)物病毒基因工程研究的理論基礎(chǔ),開創(chuàng)了我國(guó)動(dòng)物病毒基因工程疫苗實(shí)用化的先例,促進(jìn)了我國(guó)動(dòng)物基因工程疫苗的研究和應(yīng)用,對(duì)于我國(guó)偽狂犬病的預(yù)防控制措施的實(shí)施,實(shí)現(xiàn)消滅偽狂犬病,將起到?jīng)Q定性的作用。


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一、三基因缺失株、中國(guó)首創(chuàng)、全球領(lǐng)先。

本疫苗毒株是以我國(guó)豬偽狂犬病病毒流行代表毒株 Fa株為起始材料,首次在國(guó)內(nèi)通過酶切、同源重組等基因操作方法,去掉其主要毒力基因和具有潛伏感染性的基因gE 、gI和TK,構(gòu)建了獨(dú)特的三基因缺失株,為人工定向基因工程缺失疫苗。相比于自然突變?nèi)醵局昃哂懈鼉?yōu)秀的免疫原性、更好的安全性、更獨(dú)特的抗?jié)摲腥灸芰?、更適合中國(guó)國(guó)情的優(yōu)勢(shì),達(dá)到全球領(lǐng)先水平。

二、優(yōu)質(zhì)佐劑助力系統(tǒng)性免疫增強(qiáng)。

本疫苗采用優(yōu)質(zhì)復(fù)合型免疫增強(qiáng)劑為佐劑,調(diào)節(jié)免疫機(jī)能,激活機(jī)體系統(tǒng)性免疫,誘導(dǎo)更高水平的細(xì)胞免疫和體液免疫,有效對(duì)抗免疫抑制,特異性地使毒株免疫保護(hù)作用如虎添翼。

三、抗?jié)摲腥?,凈化豬偽狂犬病的尖端生物武器

本疫苗毒株“占位”于野毒侵入重要上行通道,有效阻止野毒“入侵”中樞神經(jīng)系統(tǒng),這一優(yōu)異的抗?jié)摲腥竟πЭ山鉀Q豬群偽狂犬病的“長(zhǎng)治久安”。(實(shí)驗(yàn)豬只各器官檢出野毒的情況,見下表1)

四、顯著提高母豬繁殖力和仔豬存活率,并縮短出欄日數(shù)。

對(duì)有偽狂犬病史或野毒陽性率高的豬場(chǎng),撲偽優(yōu)接種母豬后,其母豬窩平均產(chǎn)健康仔數(shù)比非免疫組高2.98頭,窩平均斷奶存活仔數(shù)比非免疫組高5.10頭(見下表)。

豬偽狂犬病病毒是造成豬只呼吸道綜合征PRDC優(yōu)勢(shì)病原之一,病毒感染導(dǎo)致育肥豬只生長(zhǎng)受阻,使用撲偽優(yōu)可同比增重21.1%,肥豬可提前出欄9-13天。

五、免疫保護(hù)建立快,抗體水平高而持久,免疫效果好,保護(hù)力強(qiáng)

1.21日齡豬只免疫SA215疫苗后,最早于第1周產(chǎn)生中和抗體,平均效價(jià)為1:12;第8周中和抗體平均效價(jià)達(dá)1:82,高于同期Bartha疫苗組中和抗體水平(平均效價(jià)為1:70);SA215疫苗組至第24周仍維持理想抗體水平,平均效價(jià)為1:31。(見下圖)。


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2.21日齡豬只分別免疫SA215疫苗和Bartha疫苗后兩周,對(duì)其進(jìn)行偽狂犬強(qiáng)毒106PFU劑量的攻毒(相當(dāng)于現(xiàn)實(shí)生產(chǎn)豬只遭遇偽狂犬野毒感染劑量的10-5倍),SA215疫苗免疫組豬只對(duì)外環(huán)境散毒的量明顯低于Bartha疫苗免疫組豬只,散毒時(shí)間至少短3天。(見下圖)



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3.21日齡豬只分別免疫SA215疫苗和Bartha疫苗后分別于第1、2、4、6、8、12、24周,對(duì)其進(jìn)行偽狂犬強(qiáng)毒5×107PFU劑量的攻毒(相當(dāng)于現(xiàn)實(shí)生產(chǎn)豬只遭遇偽狂犬野毒感染劑量的500-250倍),SA215疫苗對(duì)免疫組豬只表現(xiàn)出了良好的保護(hù)率(保護(hù)率:健康無發(fā)病癥狀豬只在實(shí)驗(yàn)豬群中所占比例,見下圖)。


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4.母豬接種后48-60h可產(chǎn)生抗體,7天可檢測(cè)抗體達(dá)1:70以上, 4周后可達(dá)1:512. 在所測(cè)定的6個(gè)月內(nèi)一直維持較高水平。(見下圖)


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5.母豬接種撲偽優(yōu)后,其所產(chǎn)仔豬具有高水平母源抗體,母源抗體之保護(hù)可達(dá)7周齡以上。(見下圖)


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六、鑒別診斷國(guó)際接軌

SA215疫苗gE基因缺失便于使用國(guó)際國(guó)內(nèi)市售主流檢測(cè)試劑盒對(duì)疫苗接種和野毒感染豬只做鑒別診斷,為豬場(chǎng)疫病****及偽狂犬凈化提供科學(xué)決策。

七、使用方法

跟胎免疫:母豬可在配種前3-4周接種一次,此后在每胎產(chǎn)前3-4周接種一次。

定期普免:全場(chǎng)豬只每年免疫3次,每4個(gè)月一次。

免疫方法:每頭劑撲偽優(yōu)使用2毫升專用稀釋液稀釋后,肌內(nèi)注射。

疫苗保存:在冷藏條件下(2℃~8℃),疫苗可保存12個(gè)月(一年)。

在冷凍條件下(-10℃~-15℃),疫苗可保存18個(gè)月(一年半)。

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